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    細胞系認證的必要性

      行業動態     |      2022-05-09 20:27:13
      世界上第一個人源的癌細胞系建立于1952年。在以后的實驗研究中,研究人員發現許多培養的細胞已經與原始的細胞株的特征不同了,可能某種細胞培養的方法會導致細胞發生變化,或者是交叉污染。
     
      基于STR的方法可以輕松、快速地鑒定細胞身份
     
      所有這些問題都可以通過價格低廉的方法來解決,這一方法目前被用于鑒定細胞系的標準程序,但是這一鑒定過程必須要進行。RoderickMacLeod及其同事在DSMZ發現約有90%的科學家在提交新細胞系時,忽視或拒絕細胞庫的要求,他們抵觸建立細胞系DNA指紋圖譜以備將來鑒定細胞系使用(5,7)。研究人員需要在他們從事研究的早期就接受教育,知道如何檢測種系內和種系間的交叉污染,并了解為什么這樣做會如此重要。
     
      在細胞培養中可以使用許多方法對交叉污染進行鑒定,如同功酶分析、染色體組分型、人淋巴細胞抗原(HLA)分型和擴增片段長度多態性(AFLP)的特征分析。但是,比較好的方法是STR圖譜法,此方法是在以DNA為基礎的法醫鑒定領域成功建立起來的。在ATCC,STR分析使用的是多重PCR系統),可以同時擴增多個STR位點加1個性別決定位點Amelogenin(10,11)。每個被分析的人源細胞系都有其獨特的DNA重復模式,因此通過與基礎圖譜進行比對,即可對每一批新細胞系的身份進行確證。STR方法防止了ATCC將其6個"錯誤"細胞系進一步傳播出去-因為經過STR分型后,發現原本來自女性的細胞系中存在著Y染色體特異的擴增產物。此研究團體希望STR圖譜技術能夠作為全球范圍的檢測并消除細胞系污染的參考技術。
     
      即使大多數科研人員所在的實驗室沒有進行STR分型的設備,他們仍可通過具備儀器(毛細管電泳)、軟件和經驗的研究所中心實驗室和專業服務公司來完成STR分型。文獻中,通常建議研究人員在培養細胞的較早階段(細胞培養第一周)來鑒定細胞系的身份。細胞在被凍存前應再一次進行鑒定;對于活躍生長的細胞,每兩個月應鑒定一次;文獻發表前也應對細胞系身份進行鑒定。如果一個實驗室使用不止一種細胞系,則應在實驗最開始時,就要對所有的細胞系進行鑒定,以便排除交叉污染(8)。
     
      總結
     
      由于細胞培養體系在生物藥物的研究和技術發展中非常重要,適當的細胞系鑒定過程即成為每個研究人員的最大興趣點。然而,交叉污染的問題仍然存在。隨著世界范圍內實驗室使用新細胞系的數量增多和頻率增加,在質量控制(如:細胞系鑒定)的基本原則上產生了巨大的差別。從已經發表的、使用"錯誤"的細胞系而導致可疑性結果的研究論文,到用于臨床的干細胞系和其它細胞系,交叉污染影響到了科學研究的每個領域-從實驗臺到臨床。如果在細胞培養的處理和操作中不進行重大變革,那么交叉污染將會成為一個更大、更嚴重的問題。
     
      細胞培養體系在生物研究和藥物研究發展中非常重要,隨著研究的深入,細胞系的種類也逐漸增多,而細胞系的交叉污染仍然存在。交叉污染給實驗研究帶來了很嚴重的問題,如果使用了錯誤的細胞系使研究的結果遭到質疑,前期的實驗可能都要重新來做。因此對細胞系的認證是有必要的。
     
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